超高效液相色谱-高分辨质谱测定大鼠血清中神经递质及其在电离辐射脑损伤动物模型中的应用

摘要

建立了超高效液相色谱四极杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)法快速分析大鼠血清中10种神经递质.以0.1％甲酸-乙腈为沉淀剂,采用蛋白沉淀法进行血清中蛋白质大分子的沉淀和目标分析物的高效萃取.建立目标分析物的精确质量数据库(质荷比、保留时间、同位素峰分布及特征碎片离子)和二级质谱库进行精准匹配鉴定,外标法定量.结果 表明,该方法的基质效应为62.4％～112.2％,相对标准偏差(RSD)为1.9％～10.1％;回收率为73.6％～104.2％,RSD为2.6％～10.6％;线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.99,检出限及定量限分别为0.05～11.63 nmol/L和0.09～46.50 nmol/L;标准溶液、质控样本及血清样本的稳定性可满足生物样本的分析要求;稀释效应的准确度为5.1％～10.6％,精密度为1.1％～5.3％,均在±15％范围之内;在高浓度样本连续进样3次后分析初始流动相,残留效应为0.4％～4.6％,符合生物样本的分析要求.此外,将本方法应用于电离辐射致脑损伤大鼠血清中神经递质代谢的研究,结果表明,电离辐射导致血清中神经递质代谢紊乱,该结果可为电离辐射损伤的生物标志物筛选提供依据.