电喷雾质谱研究甲醇诱导的溶菌酶构象变化

摘要

为了研究甲醇诱导对溶菌酶构象的影响,用电喷雾质谱(ESI-MS)结合圆二色性光谱(CD)在pH 2.0的条件下测定不同甲醇浓度的溶菌酶构象.在甲醇浓度上升到70%前,溶菌酶的ESI质谱图中电荷状态分布没有太大的变化.然而,当甲醇浓度超过75%,以16+为中心的高电荷态分布开始出现,并可以观察到两簇离子峰,表明溶菌酶的三级结构已发生变化.与此同时,圆二色性光谱显示溶菌酶的螺旋变性态的百分率明显上升,其二级结构也部分发生变化.由此可见,当甲醇浓度超过75%,溶菌酶构象将会由折叠态转变为非折叠态.差示扫描量热曲线(DSC)结果显示,固体溶菌酶溶解于5%甲醇溶液后,峰顶温度Tm将由固体的79.6℃上升到81.8℃,表明固体溶菌酶溶解于水后,热稳定性略有升高.