响应面法优化淀粉葡糖苷酶的酶反应体系

摘要

为建立并优化淀粉葡糖苷酶的酶反应体系,通过单因素分析和响应面实验设计,以淀粉葡糖苷酶能够直接作用的天然底物即淀粉为作用对象,以反应速度为指标,考察可溶性淀粉浓度、淀粉葡糖苷酶浓度、反应时间3 个因素对酶促反应速度的影响.结果表明,所建立淀粉葡糖苷酶的最佳酶反应体系为可溶性淀粉质量浓度10.30 mg/mL、淀粉葡糖苷酶浓度1.15 U/mL、反应时间7.00 min,此条件下验证得酶促反应速度可达(15.17±1.84)mmol/(L·min),与理论预测值相对误差为1.69％.用响应面法建立的模型预测值与实际值的吻合度较高,说明淀粉葡糖苷酶酶反应体系具有实际意义,可应用于有效筛选糖苷酶抑制剂等相关的研究中,以便获得可信度更高的抑制数据.