褪黑素对胰岛β细胞增殖与功能及p38 MAPK蛋白表达的影响

摘要

目的探讨褪黑素对胰岛β细胞增殖、功能和p38 MAPK蛋白表达的影响。方法采用小鼠胰岛β细胞株INS-1细胞作为研究对象。按褪黑素加药浓度分6个处理组和1个对照组,观察褪黑素对INS-1细胞的增殖和功能影响的剂量效应关系,CCK-8法检测细胞的增殖率,ELISA法检测细胞的葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能。分4组以观察褪黑素对p38 MAPK蛋白表达的影响,Western blot法检测p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平。结果与对照组相比较,各褪黑素组增殖率均显著下降,且细胞增殖率随褪黑素浓度的增加先升后降,以10 nmol/L褪黑素处理组的增殖率最高。GSIS实验结果显示,与对照组相比较,1 nmol/L、5 nmol/L、25 nmol/L、50 nmol/L和100 nmol/L褪黑素组的胰岛素浓度均显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05),且GSIS功能随褪黑素浓度的增加先升后降,以10 nmol/L褪黑素组最高。Western blot实验结果显示,与对照组相比,褪黑素组和SB203580组均能显著降低p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达水平(均P<0.05);与褪黑素组或SB203580组相比,褪黑素联合SB203580处理组p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达水平均显著降低(均P<0.05)。结论褪黑素对胰岛β细胞呈现倒U型损害作用,10 nmol/L褪黑素损害最小;褪黑素对胰岛β细胞p38 MAPK信号通路产生抑制作用。