等位基因特异性-PCR联合限制性内切酶消化法检测JAK2V617F突变

摘要

目的:建立敏感特异的JAK2V617F点突变的临床检测方法.方法:基因组DNA从HEL细胞或正常志愿者外周血中提取.采用等位基因特异性-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)和限制性内切酶消化的方法检测基因组中JAK2V617F突变.结果:本AS-PCR法可对JAK2基因扩增出364 bp的内参照条带,当存在JAK2V617F突变时,又可以扩增出203 bp的突变条带.只有野生型内参照条带364 bp可被BsaXⅠ消化切割.结论:AS-PCR法和限制性内切酶法是检测JAK2V617F突变的敏感特异的检测方法,可以成功应用于临床检测.