Janus激酶抑制剂AG490对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞JAK2/STAT3信号通路的影响

摘要

目的:研究Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂AG490对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株体外抗增殖及细胞周期的作用,探讨其对JAK2/信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路蛋白表达的影响.方法:本实验分为实验组和对照组,实验组又根据不同浓度(6.25,12.50,25.00,50.00,100.00,200.00μmol/L)的AG490处理分为6个不同浓度的实验组.采用细胞的活力测定法检测各组细胞增殖状态.应用流式细胞术对各组中细胞凋亡及周期进行分析.采用Western印迹检测处理后STAT3,p-STAT3及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达.结果:AG490处理HXO-RB44细胞株48 h后,随着药物浓度的增加,细胞抑制率增加,细胞存活率下降(均P＜0.05).除6.25 μmol/L实验组外,其余5组与对照组两两比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).流式细胞术显示:随着AG490药物浓度的增加,细胞凋亡率呈逐渐增高趋势,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05).其中,50.00和100.00μmol/L实验组G1期细胞比例显著增多,相应地处于S期的细胞比例减少.Western印迹显示:随着AG490药物浓度的增加,STAT3和p-STAT3蛋白的表达量逐渐下降,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05);VEGF表达量逐渐下降,与对照组相比,6.25和12.50 μmol/L实验组的VEGF差异均无统计学意义(均P＞0.05),其余各实验组差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:JAK抑制剂AG490能抑制HXO-RB44细胞株生长及增殖,促进细胞的凋亡增加;并通过阻断JAK2/STAT3信号通路而下调STAT3,p-STAT3和VEGF的表达,从而抑制HXO-RB44细胞株的增殖,加速其凋亡.