人正、反义转化生长因子beta 1基因真核表达载体的构建

摘要

目的:构建人转化生长因子beta 1(TGFβ1)正、反义基因真核表达载体. 方法:从人胎脑的cDNA文库中扩增出TGFβ1共1 284 bp长的DNA片段后,与T载体直接进行高效连接,并测序证实无突变.接着利用TGFβ1引物两端所设计的酶切位点将目的片段定向亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-).构建的正反义表达重组体(pcDNA3.1- TGFβ1和pcDNA3.1-anti TGFβ1)经限制性内切酶消化证实其中有目的片段完整插入. 结果:本实验成功构建了人正、反义TGFβ1基因真核表达载体.结论:人正、反义TGFβ1基因真核表达载体的构建,为今后研究腹膜纤维化的防治奠定了实验基础.