原代培养小鼠皮层神经细胞对淀粉样蛋白的内化作用

摘要

目的:观察原代培养神经细胞对淀粉样蛋白(β-amyloid protein,AB)内化,以及星形胶质细胞对这一过程的影响.方法:纯小鼠皮质神经细胞培养14 d,分成对照组和AB组,各组再分为3个亚组,分别用3种不同浓度的荧光素或荧光素标记的淀粉样蛋白1-42(AB1-42-fluo)与神经细胞共孵育24 h,在激光扫描共聚焦显微镜下直接观察或进行免疫荧光多重染色后镜下观察,结合图像分析方法分析神经细胞内化AB情况及亚细胞结构定位;另取小鼠皮质神经细胞与星形胶质细胞共培养14 d,分成对照组和AB组,各组分别与200 nmol/L荧光素或200nmol/L AB1-42-fluo共孵育24 h,采用上述方法分析比较星形胶质细胞对神经细胞内化AB的影响.结果:荧光素各组细胞内均未见荧光颗粒.培养的纯神经细胞24 h内能将浓度为100和200 nmol/L Aβ1-42-fluo内化入细胞内,荧光颗粒在神经细胞的胞体和突起均有分布.内化作用与Aβ浓度相关,经免疫荧光方法证明部分内化Aβ位于溶酶体内;在神经细胞与星形胶质细胞共培养组中,神经细胞内化Aβ较纯神经细胞培养组明显增加(P<0.05).结论:神经细胞能内化一定浓度的Aβ,星形胶质细胞具有促进神经细胞内化AB的作用.