帕金森鼠结肠黏膜炎性反应与多巴胺和5-羟色胺受体表达

摘要

目的 主要观察多巴胺(dopamine,DA)和5-羟色胺(serotonin,5-HT)受体在结肠黏膜的分布,6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)大鼠结肠黏膜通透性和炎性反应因子的改变以及DA和5-HT含量及其受体的表达变化,初步探讨DA与5-HT在结肠黏膜保护中的可能作用.方法 双侧黑质内注射6-OHDA制作帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型.通过免疫荧光染色和Western blotting法对模型进行鉴定,利用高效液相色谱-电化学检测法检测DA和5-HT的含量,通过实时定量PCR和Western blotting法检测DA和5-HT受体的表达.结果 6-OHDA大鼠黑质中酪氨酸羟化酶蛋白表达水平明显降低(对照组:0.335±0.073,模型组:0.132±0.028,P＜0.05),粪便含水量显著减少(对照组:0.119％ ±0.005％,模型组:0.062％±0.006％,P＜0.01),转棒停留时间明显缩短[对照组(35.330±3.148)s,模型组(24.000±1.424)s,P＜0.01],表明造模成功.结肠黏膜电阻降低[对照组(73.750±4.024) Ω/cm2,模型组(53.400±6.282)Ω/cm2,P＜ 0.05],异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)-葡聚糖透过量显著升高[60 min时,对照组:(18.860±1.856) μg/L,模型组:(37.000±4.457) μg/L,P＜0.05],炎性反应因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)明显增加[对照组:(269.10±18.00) ng/g,模型组:(340.40±21.52) ng/g,P＜0.05],提示6-OHDA大鼠结肠黏膜存在炎性反应.进一步发现6-OHDA大鼠结肠黏膜中DA受体D1(对照组:0.728 ±0.132,模型组:0.272 ±0.067,P＜0.01)和D5(对照组:0.721 ±0.036,模型组:0.543 ±0.051,P＜0.05)的蛋白表达水平明显降低,5-HT3的表达虽有升高趋势,差异无统计学意义(P＜0.01).而DA与5-HT含量,以及D2和5-HT4的表达水平均无明显变化.结论 6-OHDA大鼠结肠黏膜中DA受体D1和D5的表达明显降低,黏膜通透性与炎性反应因子TNF-α升高,提示6-OHDA大鼠结肠黏膜存在有炎性反应.