脱细胞猪小肠黏膜下层基质中纤维连接蛋白定量检测方法研究

摘要

采用分批次酶解和高效液相色谱与质谱分析联用技术(HPLC-MS)对脱细胞猪小肠黏膜下层(p-SIS)基质材料中纤维连接蛋白(FN)进行了定量检测.分批次酶解消除了静态酶解时间长、酶解效率低的不足,将酶解时间从96 h缩短至6 h,降解率可以达到95％以上.采用胰蛋白酶特异性酶解得到猪源FN的一个特征多肽为SSPVVI-DASTAIDAPSNLR,HPLC-MS对这一特征肽段定量检测结果表明,VIDASISTM和Biodesign?两种脱细胞材料中FN的含量分别为0.43％和0.17％.方法学实验证明该方法精确度较高(RSD为1.31％).结果表明基于质谱的分析技术可有效检测脱细胞基质中FN含量.