粉尘螨Ⅰ、Ⅱ类抗原（Derf1，Derf2）的cDNA克隆测序

摘要

粉尘螨Derf1、Derf2 cDNA的克隆及测序分析。设计合成引物，常规抽提粉尘螨螨体总RNA，RT-PCR获得cDNA，经纯化回收后分别克隆至pMD-18T，转化大肠杆菌E．coli JM109，经PCR初筛挑选阳性克隆并测序。从粉尘螨基因组RNA中扩增出Derf1、Derf2 cDNA片段，分别测得其核苷酸序列。Derf1 cDNA测序结果与GenBank提供的Derf1基因(emblX65196．1)去掉内含子后的序列经Blast分析，发现它们核苷酸同源性为99．52％，而Derf2 cDNA序列与郝敏麒等报道的广州地区粉尘螨Derf2的cDNA序列(AF346905)相比，未发现有插入序列。成功地对粉尘螨Derf1、Derf2 cDNA进行克隆测序，发现不同动物区系粉尘螨的Derf1、Derf2 cDNA序列存在差异。