马铃薯反义SSU原核表达载体的构建及其对大肠杆菌糖原合成的影响

摘要

[目的]为了鉴定马铃薯反义SSU的功能.[方法]利用分子生物学技术,构建了马铃薯反义SSU cDNA原核表达载体(pE-aS),通过0.1 mol/L IPTG诱导pE-aS在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,测定糖原的相对含量.[结果]经连接、转化和酶切鉴定筛选出重组表达载体pE-aS,而pE-aS转化BL21(DE3)获得重组菌株BL21-aS.经IPIG诱导的B121-aS糖原含量OD值为0.409,显著低于对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS,而对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS的糖原含量OD值差异不显著.这表明反义SSU在BL21内表达能够抑制glgC编码的AGPase的形成,从而减少其糖原合成量.[结论]该研究为构建马铃薯反义SSU植物转化载体奠定了基础.