乳糖诱导酸性木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达

摘要

[目的]以融合酸性木聚糖酶基因的大肠杆菌(E. coli) BL21(DE3)为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的表达规律.[方法]以重组木聚糖酶比酶活为评价指标,利用单因素试验和L_9(3~4)正交试验考察摇瓶发酵条件下诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间和诱导培养温度对木聚糖酶表达的影响.[结果]各因素影响程度依次为:诱导时机>诱导温度>诱导时间>诱导剂浓度;最优表达条件为:诱导剂浓度5 g/L、诱导时机0.5 h、诱导培养时间4.5 h、诱导培养温度32 ℃;在此工艺条件下,重组木聚糖酶比酶活可达49.69 U/mg.[结论]乳糖作为诱导剂能够成功诱导酸性木聚糖酶在大肠杆菌中的表达.