猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力

摘要

[目的]构建猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病的二联核酸疫苗并研究其免疫效果.[方法]将辽宁某猪场发病猪病料中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF 5基因克隆至真核表达载体pIRES-neo 的CMV启动子下游,然后用猪2型圆环病毒(PCV-2)的内蒙古分离株的ORF 2基因替换pIRES的neo基因,构建真核表达质粒.通过Western blot和IFA方法检测构建的重组质粒在BHK细胞中的表达情况.将重组质粒免疫Balb/c小鼠,检测免疫后的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群的数量.[结果]成功构建了重组表达质粒pIRES-ORF2-ORF5,Western blot和IFA试验证实该重组质粒在BHK细胞内成功表达了目的蛋白.与灭活苗相比,pIRES-ORF2-ORF5核酸疫苗免疫小鼠ELISA抗体水平差异不显著;其脾T淋巴细胞亚群数量显著高于灭活疫苗免疫组.[结论]构建的二联核酸疫苗能够诱导小鼠产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应,为更好地防制猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病提供了条件.