甘蓝型黑籽油菜遗传转化中预培养环节的优化

摘要

[目的]对甘蓝型黑籽油菜遗传转化中预培养环节进行优化.[方法]利用甘蓝型黑籽油菜下胚轴为外植体,对油菜下胚轴的预培养及其浸染后影响再生和分化情况进行研究,分别从苗龄、激素两方面讨论了下胚轴再生与分化频率的影响.[结果]苗龄、激素与遗传转化之间存在密切的联系.在农杆菌介导的油菜下胚轴预培养最佳体系是:4 d苗龄的外植体在农杆菌侵染前进行5d预培养,预培养基是MS+ 2,4-D 1.0 mg/L+ 6-BA 4.0 mg/L.绿色抗性愈伤组织获得GUS瞬时表达,PCR鉴定再生植株为转基因植株.[结论]该研究获得了最佳的预培养条件,为建立一个高效的遗传转化体系奠定基础.