油菜单倍体植株叶原生质体培养再生植株

摘要

以我校选育的94591、373和95386 3个油菜品种的花粉植株为材料,切取其无菌试管苗幼嫩叶片,将其切成1～2 mm细条游离原生质体.原生质体培养采用液体浅层培养、双层培养法.培养基为加有不同细胞分裂素、生长素和天然有机成分的MS液体培养液.原生质体在培养3～6 d开始第一次分裂,分裂频率最高可达14.0%,20 d后形成多细胞团,35～40 d即可形成肉眼可见的愈伤组织.将愈伤组织增殖后转移到附加了细胞分裂素6-BA和GA3的MS固体培养基上进行分化培养,40～60 d后,品种94591的愈伤组织分化出不定芽.另二个品种的愈伤组织逐步褐化,未见分化.试管苗转入添加IAA和NAA的生根培养基培养获得了再生植株.