在大肠杆菌内高效表达大分子量拟蜘蛛牵丝蛋白

摘要

依据已报道的蜘蛛(Nephila clavipes)牵丝蛋白部分cDNA序列,设计合成两种不同结构的拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体,大小分别为360和390 bp.多聚化得到8倍体和16倍体后,克隆到表达载体pET-30a,得到4种表达载体,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)诱导表达.用自制的抗蜘蛛牵丝蛋白血清Western blot检测,表达产物呈梯度排列,主带与预计大小一致.蜘蛛牵丝蛋白表达量最高为800 mg/L.