甘薯肌醇-1-磷酸合成酶基因的克隆及序列分析

摘要

甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.)新品系农大603是从感茎线虫(Ditylenchus destructor)病品种徐薯18的辐照后代中获得的一个抗茎线虫病的突变体.以农大603和徐薯18块根的mRNA为模板,根据植物抗线虫病基因NBS保守氨基酸序列设计引物,进行RT-PCR分析,发现农大603的肌醇-1-磷酸合成酶(Myo inositol-1-phosphate synthase,MIPS)基因的表达量高于徐薯18.采用3'RACE技术扩增出MIPS基因的3'末端cDNA.根据植物MIPS基因5'端一段保守的氨基酸序列设计兼并引物,并与3'端的特异引物组合,扩增出该基因的5'端cDNA序列.DNA序列比对表明,甘薯MIPS基因与大豆(Glycinemax)、番茄(Lycopersicon esculentum)的MIPS基因同源性较高,分别达83.63%和83.89%.甘薯MIPS基因全长cDNA的克隆,有利于进一步研究该基因与抗甘薯茎线虫病的关系.