牛肉中疯牛病特殊风险物质荧光RT-PCR检测方法的建立

摘要

建立了检测牛肉中疯牛病特殊风险物质(主要是中枢神经组织)标记物胶原纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA的荧光RT-PCR检测技术.结果表明,该技术具有良好的种属特异性和组织特异性,只能从牛源和羊源的中枢神经组织中检测到GFAP,猪源和禽源检测结果为阴性,而且只有脑和脊髓等中枢神经组织产生阳性反应,其它内脏组织以及不同部位牛肉检测结果均为阴性;敏感性检测结果表明,该方法最低检测限达到0.001%以下;稳定性试验结果表明,100℃加热处理30min对检测结果无明显影响,中枢神经组织在30℃以上室温可以稳定存放4 d,在4℃可以稳定冷藏2周,检测结果仍然为阳性.所建立的荧光RT-PCR技术用于牛肉中疯牛病特殊风险物质的检测具有特异性强、敏感性高、稳定性好、快速方便等优点,适合于在日常检测工作中推广使用.