山羊痘病毒P32基因跨膜区缺失载体的构建与表达

摘要

P32基因是山羊痘病毒(Capripoxvirus)的主要免疫原性基因,含有跨膜区,用全基因表达表达量较低.实验尝试用重组PCR消除跨膜区,连接入pGEX-6p-1载体,构建重组表达载体,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定结果发现,在58kD处检测到蛋白,与预期目的蛋白位置相符.表达产物以融合蛋白包涵体的形式出现在沉淀中,用山羊痘标准阳性血清对其进行Western blot检测,表达产物可被山羊痘标准阳性血清识别.用Bandscan软件对所表达的蛋白分析发现,表达产物约占菌体蛋白的29.4%.