薄壳山核桃SRAP标记体系的优化和遗传多样性分析

摘要

为确立薄壳山核桃SRAP-PCR反应体系,并对薄壳山核桃品种遗传多样性进行分析,以薄壳山核桃嫩叶提取的DNA为模板,进行Mg2+、dNTP、引物和Taq DNA聚合酶4个因素3个水平[L9(34)]正交试验,并比较了不同浓度模板DNA 对PCR扩增效果的影响.结果显示:薄壳山核桃的SRAP-PCR最佳反应体系为Mg2+ 2.5 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.4 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U.DNA模板最佳浓度为10 ng利用最佳反应体系对薄壳山核桃进行引物组合多态性筛选,从90个引物组合中筛选出多态性引物组合39个. 14个多态较高的引物组合对12个薄壳山核桃品种进行遗传多样性分析,通过PCR扩增,得到128个谱带,显示了较高的多态性,12个供试薄壳山核桃品种的遗传背景具有丰富的多样性.表明SRAP标记可应用于薄壳山核桃分子生物学研究.