马铃薯野生种Solanum pinnatisectmumgn与栽培种下寨65原生质体融合与培养研究

摘要

为获得较佳的原生质体融合培养体系,以野生种马铃薯Solanumpinnatisectmum和栽培种下寨65试管苗叶片为材料,进行原生质体分离纯化与融合培养研究,对2个融合亲本的无菌苗叶片进行原生质体化学融合和电融合.结果表明,采用电融合方式,融合参数为交变电压80 V/cm,成串时间10 s,直流脉冲1000 V/cm,作用时间60μs,脉冲l次,原生质融合效率最高,达到45.72％.融合细胞在液体浅层培养中形成0.1 mm的愈伤组织后,转入到增殖培养基(0.4 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA)中培养80 d以上,愈伤组织变为鲜绿色时,移入诱导分化培养基(0.5 mg/L IAA+2.5 mg/L Zeatin)中,愈伤组织在分化培养基上生长约60 d时,开始分化形成小芽,分化频率平均达16.7％,显著好于其他分化处理.