鸭甲型肝炎病毒1型3C 基因的原核表达与多抗的制备

摘要

以血清1型鸭甲型肝炎病毒（DHAV －1）SH 株3C 基因为序列设计1对特异性引物，RT －PCR 方法进行扩增，克隆入原核表达载体 pET －32a，转化大肠杆菌 BL21（DE3），在 IPTG 诱导下重组蛋白并获得成功表达，该重组蛋白分子量约为38 ku，能与多聚组氨酸标签单抗发生特异性反应。将目的蛋白切胶免疫 ICR 小鼠，制备重组蛋白的多抗血清，经 Western －blot 分析证明，制备的抗血清能够与 DHAV －1感染的 SPF 鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应。3C基因在大肠杆菌中可获得成功表达，制备的多抗血清可用于3C 蛋白的检测。