结核分枝杆菌E rp蛋白PGLTS的4基序突变体的构建

摘要

以结核分枝杆菌H37Ra DNA为模板，通过PCR扩增，获得靶基因erp片段。采用重叠延伸PCR的方法得到erp基因PGLTS的4基序的突变体，依次删除突变体的C－末端、N －末端和C／N －端，构建重组质粒pET28a－C4、pET28a－N4、pET28a－CN4，转化BL21（DE3）pLysS。对重组菌株IPTG诱导后的表达产物进行Tricine SDS－PAGE，得到大小分别约为11．2、15．4、4．8 ku的目的蛋白。Western blotting分析结果表明，目的蛋白表达特异。