多重荧光定量PCR法快速鉴定MRSA的临床研究

摘要

目的 构建mecA、nuc、内标基因3种基因联合检测的单管多通道Taqman探针荧光定量PCR法,用于鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),并与传统细菌培养和鉴定方法进行比较,评估其临床应用价值.方法 以169例临床标本和经常规细菌培养和VITEK2 Compact全自动微生物分析仪鉴定的金黄色葡萄球菌(SA)156株[其中MRSA 106株、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)50株]作为研究对象;用Primer premier 5.0和Beacon Designer 7.0软件进行PCR引物和Taqman探针设计,探针5'端分别标记FAM、Cy5和VIC,3'端标记MGB,用荧光定量PCR仪进行检测.169例临床标本同时也做了常规细菌培养和鉴定.结果 169例临床标本中,常规方法鉴定出MRSA 48例,检出率为28.40％;多重荧光定量PCR检测鉴定出MRSA 53例,检出率31.36％.2种方法比较,差异无统计学意义(P>0.05).156例SA的检测中,使用常规方法鉴定出MRSA 106例、MSSA 50例,MRSA检出率为67.95％;多重荧光定量PCR检测法鉴定出MRSA 108例、MSSA 48例,MRSA检出率为69.23％;两者比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 多重荧光定量PCR检测法提高了MRSA的检出率,减少了漏检风险,检测时间较常规方法明显缩短,可用于临床MRSA的快速鉴定.