建立磁微粒化学发光免疫分析法检测血清CTX

摘要

目的 建立磁微粒化学发光免疫分析法检测血清Ⅰ型胶原蛋白C末端交联肽(CTX).方法 将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗体R1、碱性磷酸酶标记的配对抗体R2(R1、R2为抗CTX单克隆抗体)和待测标本结合形成复合物.复合物通过抗FITC抗体特异性结合到磁微粒上,在磁场作用下,复合物与未结合的其他物质分离.加入酶促化学发光底物,底物发生酶促反应,形成发光反应,在检测范围内,发光强度与标本中的CTX水平成正比.评价所建立方法的最低检测限、精密度、线性范围、回收率等性能指标.结果 所建立的检测方法线性范围为0.01～6.00 ng/mL,在此线性范围内,r≥0.990;检测限为0.0098 ng/mL;批内与批间精密度分别为2.6％～5.9％和4.1％～8.1％;回收率在98.9％～102.6％;检测结果与罗氏公司生产的CTX试剂盒的检测结果具有显著相关性.结论 该研究所建立的磁微粒化学发光免疫分析法用于检测血清CTX能够满足临床需求,具有较好的推广运用价值.