PCR-反向微孔板杂交法检测医学真菌初步应用

摘要

目的 通过建立PCR-反向微孔板杂交法鉴定临床常见的致病真菌,为临床治疗提供可靠依据.方法 应用通用引物对真菌ERG11基因的保守序列进行扩增,扩增片段包被于微孔板中,再将真菌特异性引物与之杂交,经漂洗后显色,读取450 nm处吸光度值判断结果.结果 8种真菌特异性探针不与其他种的真菌、细菌和人类DNA分子杂交,而只和其对应的真菌DNA扩增产物反应,呈现阳性杂交结果.55例临床血液病、肿瘤等患者的血液、脑脊液及痰等标本分别用PCR-反向微孔板杂交法和真菌培养法(API 20C)鉴定,2种方法的结果基本一致(阳性率分别为34.5%和30.9%).结论 PCR-反向微孔板杂交法可用于临床不同标本致病真菌的检测.