旋转离心柱提取全血DNA在HLA基因分型中的应用

摘要

目的 采用旋转离心柱提取人类基因组DNA,能更好的适用于临床肾移植特别是尸肾移植的HLA基因分型.方法 18份EDTA-K2抗凝的2 ml全血标本分别采用标准酚-氯仿法、快速盐析法和旋转离心柱法提取DNA,做HLA-DR基因分型.然后就所获DNA浓度和纯度、操作时间、分型结果3个方面进行统计学分析.结果 3种方法提取的DNA平均含量差异无统计学意义;采用旋转离心柱法和标准酚氯仿法提取的DNA纯度高于快速盐析法差异有统计学意义;整个操作时间旋转离心柱快于标准酚氯仿法和快速盐析法,差异有统计学意义;5份全血标本采用这3种方法获得的模板DNA基因分型结果完全相同,差异无统计学意义.结论 采用旋转离心柱提取人类白细胞DNA,操作简单、快速,总耗时60～70 min,分型方法稳定、可靠,无一例失败,能更好的适用于临床肾移植特别是尸肾移植的HLA基因分型.