全反式视黄酸对体外培养人巩膜成纤维细胞的抑制作用

摘要

目的:观察全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,RA)对体外培养的人巩膜成纤维细胞(human scleral fibroblasts,HSF)的形态、增殖能力和自我更新能力以及细胞周期的影响,探讨RA对巩膜成纤维细胞的作用.方法:原代培养HSF,波形蛋白和角蛋白对细胞进行鉴定.用不同浓度RA培养HSF,相差显微镜下动态观察其形态和数量变化;MTT法检测HSF在不同浓度RA培养后的细胞增殖和自我更新能力;FCM方法检测不同浓度RA对HSF细胞周期的影响.结果:MTT法显示RA对HSF有明显的抑制作用,该效应呈剂量依赖性反应.RA培养后HSF细胞数目减少,细胞收缩,突起减少,部分裂解,胞浆内有空泡和颗粒形成,细胞之间的间隙增宽,细胞变得细长,呈束状或不规则排列.FCM结果显示和对照组比较,随着RA浓度和时间的增加,G0/G1期细胞的比例逐渐上升,而S期和G2期细胞比例相应下降,细胞被阻滞在G0/G1期.结论:RA可抑制体外培养HSF的增殖和DNA合成.