一种单个胚胎的DNA模板制备方法

摘要

建立了一种简单处理单个卵子和早期胚胎制备DNA模板的方法--KOH/DTT-TritonX裂解法,并与TE-蛋白酶K法比较了PCR扩增效率.结果表明:采用KOH/DTT-Triton X裂解法处理单个卵子或2-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚、囊胚后,作为DNA模板直接进行PCR扩增线粒体DNA片段,3对引物的PCR扩增总成功率为100%(70/70),而TE-蛋白酶K法处理的单个卵子的PCR扩增总成功率为92.9%(65/70),二者差异显著(P＜0.05).但两种方法所制备模板的PCR假阳性率均为0.实验设计的KOH/DTT-Triton X裂解法是一种有效的单个早期胚胎的DNA模板制备方法,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带,能够满足早期胚胎遗传物质检测的需要.