葛根素联合磷酸三钙支架的制备及对激素性股骨头坏死大鼠的修复作用研究

摘要

目的:制备葛根素/磷酸三钙支架材料,观察其细胞相容性,并检测其对激素性股骨头坏死大鼠骨修复的作用.方法:以葛根素与磷酸三钙为材料,根据负压吸附的原理制备葛根素/磷酸三钙支架材料.通过扫描电镜观察支架材料表面形貌,检测抗压强度和孔隙度,以及不同浓度葛根素/磷酸三钙支架材料对骨细胞MLO-Y4活性和生长的影响.将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、复合支架组,每组20只,模型组和复合支架组尾静脉注射2mg/kg LPS,1次/d,持续2d,最后一次注射LPS后接着腹腔注射20mg/kg甲基强的松龙,1次/d,持续3d,构建股骨头坏死模型,造模后复合支架组大鼠植入葛根素/磷酸三钙支架材料,12周后采集大鼠血液,全自动生化仪检测血清中钙、磷含量,酶联免疫试剂盒检测骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)含量,Micro-CT扫描仪检测各组大鼠股骨骨矿物质密度(BMD)、小梁骨体积分数(Tb.BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁数目(Tb.N),苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠股骨组织病理学变化,免疫组织化学染色检测股骨组织中VEGF与Runχ2表达.结果:制备的葛根素/磷酸三钙支架材料具有多孔网状结构,抗压性强度增加,孔隙率减小;葛根素/磷酸三钙支架材料浸提液可增加MLO-Y4细胞活性.与对照组比较,模型组大鼠股骨组织出现明显的坏死现象,BMD降低,Tb.BV/TV、Tb.Th和Tb.N均减少,血清中血钙、血磷水平下降,BALP水平升高,BGP水平下降,股骨组织中VEGF与Runχ2表达下降;与模型组比较,复合支架组大鼠骨组织坏死病变得到明显改善,BMD升高,同时Tb.BV/TV、Tb.Th和Tb.N均增加,血清中血钙、血磷水平增加,BALP水平下降且BGP水平升高,股骨组织中VEGF与Runχ2表达升高.结论:葛根素/磷酸三钙支架材料对于激素性股骨头坏死大鼠的坏死股骨具有良好的修复作用.