RP-HPLC法分析人血白蛋白肽谱方法的建立

摘要

目的 建立人血白蛋白(plasma human serum albumin,pHSA)肽谱分析方法 .方法 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)的方法 ,分别用胰蛋白酶还原及非还原方法 裂解pHSA,用Sephasil petide C18柱,以0.1%(v/v)TFA/水、0.08%(v/v)TFA/乙腈为流动相,流速0.5 ml/min梯度洗脱的方法 ,检测波长214nm,分析PHSA肽谱.结果 pHSA经胰蛋白酶还原或非还原裂解,适当的酶与底物的比例及酶解的时间,都可以得到重现性好的稳定的肽谱.结论 RP-HPLC法具有灵敏度高,重现性好等优点.本法适用于重组PHSA的肽谱分析.