护肝解毒方调控NAFLD大鼠机制的网络药理学及实验研究

摘要

目的 运用网络药理学等生物信息学技术预测以及非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠模型实验验证研究,揭示护肝解毒方改善NAFLD的主要作用机制.方法 通过网络药理学方法筛选出护肝解毒方主要作用成分及其NAFLD主要作用靶点,并进行基因通路分析和GO富集分析,定位护肝解毒方作用的关键通路和生物学功能.动物实验采用Wistar雄性大鼠30只随机分为正常组、模型组、护肝解毒方组,每组10只.检测实验前后各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、肝脏组织活性氧(ROS)等生化指标、肝组织病理以及NAFLD关键靶点蛋白mRNA表达水平变化.结果 网络药理学方法筛选出了护肝解毒方9个主要作用成分以及12个NAFLD相关作用靶点,预测出沉默信息调节因子1(SIRT1)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBF1)等是护肝解毒方主要成分-NAFLD相关作用靶点中的核心蛋白;KEGG通路分析和GO富集分析表明护肝解毒方主要作用靶点与NAFLD的相关信号通路、病理和生物过程密切相关.动物实验生化指标检测显示模型组大鼠的ALT、AST、γ-GT、TC、TG、FBG、ROS等指标均较正常组显著升高,护肝解毒方组大鼠的ALT、AST、γ-GT、TC、TG、FBG、ROS等指标较模型组显著降低,差异均有显著统计学意义(P<0.01);HE染色可见护肝解毒方对NAFLD大鼠肝脏组织脂肪变性具有明显的减轻作用;Real-Time PCR实验显示,模型组大鼠肝脏Sirt1 mRNA表达水平显著低于正常组,Srebp1 mRNA表达水平显著高于正常组,护肝解毒方组大鼠肝脏Sirt1 mRNA表达显著高于模型组,Srebp1 mRNA表达显著低于模型组,差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 护肝解毒方能有效调控NAFLD大鼠SIRT1和SREBF1等肝脂代谢相关基因表达、改善糖脂代谢、减少肝脏氧化应激,减轻肝细胞脂肪变性.