积雪草苷调控基质金属蛋白酶-9减轻川崎病血管损伤的机制研究

摘要

目的探讨积雪草苷对川崎病血管损伤的影响及其可能作用机制。方法采用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人冠状动脉血管内皮细胞建立川崎病血管损伤模型,分为7组:con组、TNF-α组、TNF-α+低积雪草苷组、TNF-α+中积雪草苷组、TNF-α+高积雪草苷组、TNF-α+积雪草苷+pcDNA组、TNF-α+积雪草苷+pcDNA-MMP-9组;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;qRT-PCR检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达水平;ELISA法检测IL-6、IL-1的水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2、MMP-9蛋白表达量。结果与con组比较,TNF-α组细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高,IL-6、IL-1的水平升高,MMP-9 mRNA及蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与TNF-α组比较,TNF-α+低积雪草苷组、TNF-α+中积雪草苷组、TNF-α+高积雪草苷组细胞凋亡率和Bax蛋白水平降低,IL-6、IL-1的水平降低,MMP-9 mRNA及蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性;与TNF-α+积雪草苷+pcDNA组比较,TNF-α+积雪草苷+pcDNA-MMP-9组MMP-9 mRNA及蛋白水平升高,细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高,IL-6、IL-1的水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论积雪草苷可通过下调MMP-9表达而抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞凋亡及炎症反应从而减轻川崎病血管损伤。