草鱼细菌性烂鳃病病原菌的分离及其特异性卵黄抗体的初步研究

摘要

试验从患典型烂鳃病草鱼病变部位分离到1株柱状黄杆菌(FC-3株),采用0.4％甲醛灭活制成免疫原,接种健康120日龄桃源蛋鸡,收集鸡蛋并提纯卵黄抗体(IgY),并以此IgY为基础建立间接ELISA方法.结果:用FC-3株制备的IgY经初步提纯后电泳分离可见重链和轻链2条蛋白条带,获得了IgY多克隆抗体.建立的间接ELISA方法检测柱状黄杆菌纯培养液的检出限值为1×107 cfu/mL,抗原包被最佳浓度和抗体最佳工作浓度分别为1∶100和1∶512,辣根过氧化物酶标记兔抗鸡IgY最佳工作浓度为1∶4000.结论:建立的间接ELISA方法对柱状黄杆菌有明显的检测特异性,与其他菌株无交叉反应,重复性好.