药用植物草珊瑚RAPD扩增条件优化

摘要

采用CTAB-DNA提取方法,从草珊瑚植物的嫩叶中提取总DNA.以此DNA为模板,优化了草珊瑚RAPD-PCR的反应条件.结果表明,PCR扩增体系最适宜的条件为:反应体积25μL,内含2.5 mmol/L Mg2+、1.0U DNA聚合酶、0.4μmol/L引物、60 ng模板DNA和0.16 mmol/L dNTP.扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,37℃复性30 s,72℃延伸80 s,40个循环;72℃延伸10 min;4℃保存10 min.