siRNA反向转染人肺动脉平滑肌细胞的条件优化

摘要

目的 寻找小分子干扰RNA转染人肺动脉平滑肌细胞的的最佳条件,建立有效的转染体系.方法 采用化学合成的能够抑制管家基因表达的siRNA,以0,5,10,15,30nmol/L的siRNA浓度,应用脂质体Lipofacet-amine RNAi MAX转染人肺动脉平滑肌细胞,转染48小时后通过显微镜观察和CCK-8检测细胞的增殖情况,评估转染效率.结果 对照组细胞生长正常,在不同转染浓度下,细胞的生长情况受到不同程度的影响.试剂对照组与空白对照组(0nmol/L组)细胞增殖无差异(P＞0.05),10nmol/L以上浓度组的转染效率显著高于5nmol/L组(P＜0.05),10、15和30nmol/L组转染效率差异不显著(P＞0.05).结论 化学合成的siRNA可以在10nmol/L的浓度即可获得理想的转染效果.