碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究

摘要

[目的]从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究.[方法]以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73.通过形态观察和16S rRNA序列分析对菌株进行鉴定.采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响.[结果]该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0～11.0、30～37℃条件下生长.16S rRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesia sp.)PC1序列相似度大于99％,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株.在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右.粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL.在pH值8.0～11.0的范围内保持60％以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30～80℃的范围内保持60％以上的酶活.金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用.[结论]菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景.