非标记定量蛋白质组技术筛选早期糖尿病肾病大鼠的尿蛋白标志物

摘要

cqvip:目的 利用非标记定量蛋白质组技术筛选早期糖尿病肾病(DN)大鼠的尿蛋白标志物。方法 将16只大鼠随机均分为正常对照组和糖尿病模型组,采用链脲佐菌素建立糖尿病模型。将糖尿病大鼠成模前、成模后1周、成模后24周分别设为非糖尿病(ND)期、正常白蛋白尿(NA)期、微量白蛋白尿(MA)期,收集各期尿液标本。将尿标本超滤离心和浓缩后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳粗分离尿样品的蛋白,行液相色谱-电喷雾电离串联质谱,以非标记定量蛋白质组技术筛选出差异表达的尿蛋白。采用酶联免疫吸附法对感兴趣的尿蛋白作确认。对比MA期糖尿病大鼠和正常对照组大鼠的光镜下肾组织结构。结果 与NA期比较,MA期表达显著上调的蛋白质共15个,表达显著下调的蛋白质共12个。选取尿胎球蛋白A进行确认,糖尿病大鼠MA期的尿胎球蛋白A/尿肌酐水平均高于NA期、ND期(均P<0.05)。光镜下MA期大鼠肾组织呈早期DN病理改变。结论 应用非标记定量蛋白质组技术可筛选出早期DN大鼠的差异表达尿蛋白,其中尿胎球蛋白A或可作为早期DN的诊断标志物。