米诺环素对缺血性脑卒中血脑屏障重塑的影响及其机制

摘要

目的 探索米诺环素(minocycline,MC)对大鼠局限性脑缺血再灌注后血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)重塑及神经保护的作用机制及影像可视化.方法 48只SD大鼠随机分为4组:早期给药组、晚期给药组、生理盐水组及假手术组,每组12只.其中早期给药组于手术后即刻尾静脉注入MC(3 mg/kg);晚期给药组于拔线后恢复再灌注6 h后大鼠尾静脉注入MC(3 mg/kg);生理盐水组于再灌注即刻注入相同体积的生理盐水;假手术组除了不插入线栓外,其余处理同生理盐水组.再灌注24 h后进行神经功能评分,并采用HE、免疫组化、Western blot、免疫荧光及磁共振成像等方法观察MC对脑缺血再灌注后BBB重塑的影响及影像学改变.结果 缺血再灌注24 h后各组神经功能缺损评分差异有统计学意义(P<0.001),其中生理盐水组神经功能缺损评分高于给药组;早期给药组神经功能缺损评分低于晚期给药组.磁共振图像显示各组最终梗死体积差异有统计学意义(P<0.001).早期给药组及晚期给药组梗死体积显著小于生理盐水组,早期给药组小于晚期给药组,假手术组未显示梗死灶.给药组脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、CD11b的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组脑组织中转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、YM1、RECA-1、PDGFR-β的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组.给药组血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组.Western blot结果显示给药组IL-1β、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、TNF-α的表达低于生理盐水组,且早期给药组低于晚期给药组;给药组claudin-5、occludin、ZO-1、IL-10、TGF-β和YM1的表达高于生理盐水组,且早期给药组高于晚期给药组.结论 MC可有效减轻缺血再灌注损伤促发BBB重塑,立即给药对神经功能障碍的改善作用更明显.