建立SP-A检测法测定体外循环前后猪SP-A含量变化

摘要

目的建立肺表面活性蛋白A(SP-A)的整套检测方法,并以之测定体外循环前后幼猪的支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A含量.方法灌洗新鲜猪肺取得BALF,经过抽提、透析、离心、亲和柱层析,获得SP-A.以之免疫大白兔,得到兔抗猪SP-A抗体.使用该抗体,以蛋白免疫印迹反应法检测9头幼猪在体外循环(CPB)前、CPB 120min、CPB后180min采集的BALF中SP-A含量.结果制备出猪SP-A和兔抗猪SP-A抗体.成功测定幼猪体外循环前后BALF中SP-A含量.结论蛋白免疫印迹反应法测定SP-A方法的建立,为进一步研究体外循环对表面活性蛋白乃至表面活性物质的影响打下良好基础.