少突胶质祖细胞的体外分离、培养和定向分化

摘要

目的 探索体外培养获得高纯度少突胶质祖细胞的方法,观察少突胶质祖细胞的形态学特点以及增殖和分化规律.方法 选取新生1～2 d SD大鼠,应用选择性分离程序,根据细胞的不同贴壁特性,通过2次细胞选择性贴壁培养和2次不同频率的振荡,分离纯化少突胶质祖细胞.应用物理振荡方法进行细胞传代,进一步纯化细胞.传代细胞分别用无血清和有血清的培养基培养,应用免疫荧光法进行细胞鉴定.结果 纯化后的少突胶质祖细胞达95%.在无血清的情况下,少突胶质祖细胞定向分化为少突胶质细胞;在有血清的情况下,定向分化为2-型星形胶质细胞,并且细胞骨形态形成性蛋白质4(BMP4)表达增加.结论 应用选择性分离程序,通过振荡分离的方法可以获得高纯度的少突胶质祖细胞.少突胶质祖细胞具有增殖和双向分化的潜能.BMP4参与了祖细胞定向分化的调控.