影响核移植后小鼠重构胚存活因素的研究

摘要

将不同类型的供体细胞(卵丘细胞、心肌细胞和上皮细胞)的遗传物质注射到去核的MⅡ卵母细胞中,获得各种重构胚胎,以分析对小鼠卵母细胞进行核移植操作获得重构胚过程中的各种影响因素.结果表明,用Giemas染料将挤出的卵母细胞质染色证实,可以完整地去除MⅡ卵母细胞核.对370个MⅡ卵母细胞进行去核,去核成功率为92.4%,注核成功率为82.1%;给予90 v/mm,80μsec,1次电脉冲刺激,融合率为72.1%;将融合激活后的重组胚转入KSOM培养基中,平均囊胚率达到35.8%.在胚胎重构过程中,出现了核仁显著变大,出现不同数量核仁的现象.通过比较各种重构胚胎体外后续发育,结果卵丘细胞重构胚胎的体外发育率最好.