蛋白酶抑制剂MG-132对牛核移植重构胚重编程的影响

摘要

旨在探讨MG-132对牛体细胞核移植重构胚重编程的影响.将牛卵母细胞体外培养至MI期,添加不同浓度的MG-132(0、3、5、7、10 μmol·mL-1),至成熟后进行激活,通过胚胎的发育情况得出MG-132的合适浓度,并用此浓度的MG-132作用于核移植全过程,来研究MG-132的作用,用免疫组化的方法进一步验证结果.结果,5、7μmol·mL-1 MG-132组卵裂率和囊胚率均显著低于对照组和2 μmol·mL-1组(P<0.05),但这2组间无显著差异(P>0.05),而10 μmol.mL-1组卵裂率只有23.44%,低于其他各组(P<0.05);成熟卵母细胞在5 μmol·mL-1MG-132中分别作用0、2、4 h激活后,卵裂率、囊胚率均无显著差异(P>0.05),而6 h组激活后卵裂率,囊胚率均明显降低(P<0.05);核移植操作过程中添加MG-132组的卵裂率与对照组相比无显著差异(P>0.05),而桑葚胚和囊胚率都较对照组显著升高(P<0.05);未添加MG-132组,融合后1 h供体细胞几乎无变化,4 h后核纤层蛋白(1amin)着色显著,说明染色体凝集不完全;添加组融合4 h后,核膜不完全着色,明显发生了染色体凝集.上述结果说明5 μmol·mL-1MG-132能够促进重构胚的重编程,但对重构胚移植后的附植和妊娠作用还有待进一步研究.