油棕细胞悬浮培养及植株再生技术

摘要

[目的]建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考.[方法]以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏与德夸霉素组合诱导易碎胚性愈伤组织,分析不同激素质量浓度及其组合对油棕体细胞悬浮系增殖与后续体胚发育的影响.[结果]0.1 mg/L德夸霉素与一定浓度2,4-D或麦草畏组合,促进胚性愈伤组织形成,0.1 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合诱导易碎胚性愈伤组织较佳,诱导率为28.67％;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;0.3 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合较有利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育;将悬浮细胞系转到MS+谷氨酰胺100 mg/L+蔗糖30g/L培养基上,于28(±2)℃、2 000 lx下进行胚诱导培养,每两周更换新培养基1次,培养60 d可获得直径大于1 mm的胚,最高每瓶295粒;将大于1 mm的胚转到固体培养基培养可获得再生植株.[结论]适当质量浓度德夸霉素与2,4-D或麦草畏组合,促进油棕芯叶瘤状愈伤组织形成易碎胚性愈伤组织;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;初步发现含适当质量浓度德夸霉素与麦草畏液体培养基利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育.