柔嫩艾美耳球虫广东株微线蛋白-2 基因的克隆与序列分析

摘要

根据柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白-2基因的cDNA序列设计一对特异性引物,以E.tenella广东株(EtGD)子孢子总RNA为模板,用RT-PCR方法成功扩增出EtGD微线蛋白-2(EtMic-2,GD)的cDNA序列.PCR产物连接到质粒pGEM-T-easy后,转化大肠杆菌DH5α.重组质粒经测序并与E.tenella北京株和豪顿株的MIC-2比较,开放阅读框架(ORF)核苷酸序列的同源性分别为99.70%(1023/1026)和99.61%(1022/1026),推导的氨基酸序列间分别有两个氨基酸不同,同源性为99.41%(340/342),经DNA sisst 1.02分析,这种差异可影响EtMic-2的抗原性.