RNA干扰抑制猪繁殖与呼吸综合症病毒N基因表达及病毒复制

摘要

根据siRNA设计原则,选取了PRRSV N基因上的保守序列作为可能的干扰位点,设计、合成了3个siRNAs,分别将其克隆到pSIREN-Shuttle中,获得3个siRNA重组表达质粒:pShuttle-NI,pShuttle-N2和pShuttle-N3.将siRNA重组表达质粒与融合表达质粒pEGFP-ORF7共转染Marc 145细胞,并通过荧光显微镜观察.结果显示,siRNA重组表达质粒能显著抑制PRRSV N基因的表达.在转染总剂量(0.7 μg/孔)固定的条件下.分别将不同组合的siRNA表达质粒共转染Marc 145细胞,各组合转染孔对PRRSV复制的抑制作用没有明显差异,其中3种siRNA表达质粒共转染对PRRSV复制的抑制最好,证实siRNA对病毒复制作用具有相加性.