猪圆环病毒2型LAMP诊断方法的建立及初步应用

摘要

根据GenBank中的猪圆环病毒2型ORF2基因序列,设计合成2对引物,通过对环介导等温(LAMP)扩增条件的优化,敏感性、特异性试验,成功建立了猪圆环病毒2型LAMP诊断方法.敏感性结果显示,建立的LAMP诊断方法最低核酸检测量为0.30 pg/L,而PCR诊断方法最低核酸检测量为30 pg/L;特异性结果显示,猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒的扩增结果均为阴性.对95份自然感染病猪样品的检测结果表明,该LAMP方法检测结果与PCR检测结果符合率为95.8％.整个扩增反应可在30 min内完成,结果肉眼可见,为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便可行的方法,能够满足基层现场快速检疫的需要.