芍药苷调节高糖环境下线粒体相关内质网膜对雪旺细胞凋亡的影响

摘要

目的 探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)调节高糖环境下线粒体相关内质网膜(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs)干预雪旺细胞(schwann Cell,SCs)凋亡的机制.方法 采用高糖环境下的SCs模型,观察PF对高糖环境下24和48小时RSC96细胞的影响;设立空白对照组,模型对照组,PF低、中、高剂量组;采用激光共聚焦法观察MAMs的形态并检测其含量;采用流式细胞术检测细胞内的钙离子浓度(Ca2+);采用Western blot法定量检测MAMs中线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)的表达;采用Elisa法检测MAMs中蛋白激酶R样内质网激酶(PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)的表达.结果 干预24和48小时后,(1)模型对照组SCs形态由棱形变为不规则圆形,其MAMs的含量和质量均比空白对照组下降(P<0.01),不同浓度的PF组SCs形态有所改善,MAMs的含量与质量均比模型对照组有明显提升(P<0.01);(2)模型对照组Mfn2表达比空白对照组明显下降(P<0.01),PF低、中、高剂量组Mfn2表达均比模型对照组明显提升(P<0.01);(3)模型对照组PERK表达比空白对照组明显升高(P<0.01),PF低、中、高剂量组PERK表达比模型对照组显著下降(P<0.05或P<0.01);(4)模型对照组细胞内Ca2+比空白对照组明显提高(P<0.01),PF低、中、高剂量组比模型对照组均显著降低(P<0.01).结论 PF能够通过上调Mfn2的表达并抑制PERK表达,增加SCs内MAMs数量,改善SCs形态,降低细胞内Ca2+,减轻钙超载,从而减少SCs凋亡,有利于改善糖尿病周围神经病变.