甘蓝型油菜再生体系中的种子灭菌和生根培养基的优化

摘要

cqvip:【目的】植物的种子灭菌和生根培养是组织培养的重要步骤。目前已报道的用于甘蓝型油菜种子灭菌的次氯酸钠(NaClO)浓度、灭菌时间和生根培养基的植物生长调节剂种类及其浓度均存在较大的差异,因此,本研究旨在筛选出甘蓝型油菜种子的最佳NaClO灭菌处理方法和生根培养基最适的植物生长调节剂及其浓度。【方法】比较了甘蓝型油菜的种子经不同浓度(浓度范围为0.1%~30.0%)NaClO灭菌后的发芽率、健康芽率和菌落率,筛选出最适的种子灭菌NaClO浓度,再在该最适NaClO浓度基础上找出了最适的种子灭菌时间;通过比较不同质量浓度(0.1~2.0 mg·L^−1)的植物生长调节剂萘乙酸(NAA)或吲哚丁酸(IBA)对甘蓝型油菜再生根的促进作用,找出油菜生根培养最适的植物生长调节剂种类及其浓度。【结果】甘蓝型油菜种子的最佳灭菌NaClO浓度为2.0%或3.0%,在3.0%NaClO下的最适灭菌时间为15 min,种子经该灭菌方法处理后的发芽率和健康芽率分别可达97.4%和85.9%,且菌落发生率最少。该油菜种子灭菌的方法也适用于其他9个植物品种,尤其适合于甘蓝型油菜、大白菜和拟南芥的种子灭菌。在生根培养基中添加0.1 mg·L^−1 NAA对甘蓝型油菜再生根的促进作用最强,油菜培养7 d后即有92.5%的累积生根率,再生根从切点处生长,且再生的须根数最多。【结论】本研究优化了甘蓝型油菜种子的NaClO灭菌方法和生根培养基的植物生长调节剂及其浓度,为高效的油菜组织培养研究奠定了基础。